伪狂犬病病毒gB蛋白单抗的制备及其夹心ELISA检测方法的建立

作     者：王方 张泽财 袁悦 张胜 王旭 林倩 李子义 王新平 WANG Fang;ZHANG Ze-cai;YUAN Yue;ZHANG Sheng;WANG Xu;LIN Qian;LI Zi-yi;WANG Xinrping

作者机构：吉林大学第一医院/转化医学研究院吉林长春130021 吉林大学动物医学学院吉林长春130062 吉林大学人兽共患病研究所教育部人兽共患病研究重点实验室吉林长春130062 

出 版 物：《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)

年 卷 期：2020年第40卷第2期

页      面：225-230页

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：国家重点研发计划资助项目(2017YFD05001040) 教育部创新团队发展计划资助项目(IRT1248) 吉林省优秀青年人才基金资助项目(2019010310JH) 

主　　题：伪狂犬病病毒 gB蛋白 单克隆抗体 夹心ELISA 

摘      要：应用PCR技术扩增出伪狂犬病病毒(PRV)gB基因,并将克隆的目的片段连接到表达载体pGEX-4T-1,构建原核表达重组质粒pGEX-4T-1-B。以表达纯化的gB重组蛋白为抗原,制备单克隆抗体和兔源多克隆抗体,并以制备的抗体建立检测PRV抗原的双抗体夹心ELISA方法,同时对吉林省某地区猪群感染PRV的情况进行流行病学调查。结果显示,试验成功制备PRV gB蛋白单抗并建立其夹心ELISA检测方法。流行病学调查发现,PRV在吉林省某地区猪群的平均感染率为9.3%,且妊娠母猪阳性率高达11.7%,该结果为伪狂犬病的防治提供了理论依据。结果表明,本研究建立的双抗体夹心ELISA方法具有特异、敏感、简便与快速等优点,可用于PRV抗原的快速检测,为今后该病的诊断和流行病学调查研究提供技术手段。