猪伪狂犬病病毒野毒和猪圆环病毒3型双重PCR检测方法的建立

作     者：赵宇 崔建涛 田润博 韩昊莹 郑慧华 刘芳 陈红英 ZHAO Yu;CUI Jim-tao;TIAN Run-bo;HAN Hao-ying;ZHENG Hui-hud;LIU Fang;CHEN Hong-ying

作者机构：河南农业大学牧医工程学院河南郑州450002 郑州市猪重大疫病防控重点实验室河南郑州450002 

出 版 物：《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)

年 卷 期：2020年第40卷第1期

页      面：9-13页

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：河南省高校科技创新团队支持计划资助项目(19IRTSTHN007) 河南省科技开放合作资助项目(182106000048) 

主　　题：猪伪狂犬病病毒 猪圆环病毒3型 双重PCR检测方法 

摘      要：为了能够同时检测和鉴别猪伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)和猪圆环病毒3型(porcine circovirus type 3,PCV3)。本研究参考GenBank中公布的PRV gE基因和PCV3基因组序列,且基于PRV gE和PCV3 Rep基因的保守区域,利用Primer 5.0引物设计软件设计了2对特异性引物,随后对其扩增条件进行优化,建立了能够同时检测PRV和PCV3的双重PCR检测方法。该方法可以同时扩增PRV的429 bp和PCV3的344 bp特异性片段,而对猪圆环病毒2型、猪细小病毒、猪瘟病毒、猪繁殖障碍与呼吸综合征病毒、猪流行性腹泻病毒基因组扩增结果均为阴性。PRV和PCV3的最低检测值分别为502.0和91.2 copies/μL。结果表明该方法具有良好的特异性和灵敏性。本试验建立了能够同时快速检测PRV和PCV3,且具有高度特异性和灵敏性的双重PCR检测方法,为PRV和PCV3的检测提供技术支持。