遗传性白内障致病基因 GJA3(P187S)的功能机制研究

作     者：丁旭晨 房春来 Ding Xuchen;Fang Chunlai

作者机构：哈尔滨医科大学附属第四医院眼科 

出 版 物：《国际遗传学杂志》 (International Journal of Genetics)

年 卷 期：2019年第42卷第6期

页      面：405-406-407-408-409-410页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100212[医学-眼科学] 10[医学] 

基　　金：哈尔滨医科大学创新研究项目(2017LCZX100) 

主　　题：遗传性白内障 缝隙链接蛋白 基因突变 

摘      要：目的前期研究证实GJA3 (c.559CT)突变即GJA3(p.P187S)为一遗传性白内障家系的致病基因, 本课题旨在对遗传性白内障致病基因GJA3 (c.559CT)进行功能分析及致病机制研究。方法构建野生型GJA3和突变型GJA3 (c.559CT)真核表达载体, 分别进行人宫颈癌细胞(HeLa)细胞转染, 通过免疫荧光染色方法观察蛋白亚细胞定位差异;运用Western印迹方法检测野生型与突变体GJA3(P187S)在蛋白表达水平的差异;通过TUNEL染色及流式细胞技术比较野生型与突变型GJA3(P187S)凋亡率差异。结果共聚焦显微镜观察发现GJA3-WT组蛋白与GJA3(P187S)组突变体蛋白均在细胞膜定位, 没有亚细胞定位的差异。Western印迹方法检测野生型GJA3-WT组与突变型GJA3(P187S)组蛋白的表达情况, 结果显示GJA3(P187S)突变并未明显影响GJA3蛋白即缝隙链接蛋白46的表达水平。TUNEL染色及流式细胞分析结果显示GJA3(P187S)突变体组凋亡率较高。结论本研究对一遗传性白内障家系的致病基因GJA3 (c.559CT)进行突变功能研究, 结果表明GJA3 (c.559CT)突变未改变GJA3蛋白的亚细胞定位及蛋白表达水平, 但可引起该组细胞的凋亡率呈上升趋势。