杉木体细胞胚胎发生胚性愈伤组织诱导条件的优化

作     者：吴夏雷 韩超 孙宇涵 曹森 胡瑞阳 徐金良 郑会全 李云 Wu Xialei;Han Chao;Sun Yuhan;Cao Sen;Hu Ruiyang;Xu Jinliang;Zheng Huiquan;Li Yun

作者机构：林木分子设计育种高精尖创新中心树木花卉育种生物工程国家林业和草愿局重点实验室林木育种国家工程实验室北京林业大学生物科学与技术学院北京100083 中国林业科学研究院华北林业实验中心北京102300 浙江省开化县林场浙江开化324300 广东省林业科学研究院广东广州510520 

出 版 物：《北京林业大学学报》 (Journal of Beijing Forestry University)

年 卷 期：2020年第42卷第2期

页      面：79-86页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 090701[农学-林木遗传育种] 0907[农学-林学] 07[理学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 

基　　金：中央高校基本科研业务费专项(BJFUKF201918) 中央高校基本科研业务费专项(2015ZCQ-SW-03) 广东省省级科技计划项目(2016B020201002) 北京林业大学科学技术研究项目(2018WS01) 

主　　题：杉木 体细胞胚胎发生 胚性愈伤组织 优化 

摘      要：【目的】优化杉木体细胞胚胎发生过程中胚性愈伤组织的诱导条件,探究基本培养基、供体母株基因型和外源添加剂对杉木体胚诱导的影响。【方法】以3个供体母株基因型(Z1、Z2、Z3)的杉木雌配子体(其未成熟合子胚处于裂生多胚期)为外植体,采用6种基本培养基及不同浓度的外源添加剂塞苯隆(TDZ)和茉莉酸甲酯(MeJA)处理,并对诱导培养过程中的愈伤组织进行细胞学观察。【结果】以DCR为基本培养基,诱导培养效果最好,愈伤组织诱导率达70.74%,胚性愈伤组织的诱导率达17.36%;供体母株基因型对胚性愈伤组织诱导有较大影响,Z1基因型供体母株的雌配子体最适合用于诱导产生胚性愈伤组织,诱导率为14.73%;诱导培养时以DCR为基本培养基,添加蔗糖30 g/L、活性炭1 g/L、倍力凝5 g/L并附加植物生长调节剂2,4-D 1.5 mg/L、KT 0.4 mg/L、MeJA 1.2μmol/L和TDZ 0.004 mg/L,杉木胚性愈伤组织的诱导率最高,达19.83%;仅需4 d就可诱导产生胚性愈伤组织,不同阶段原胚团的结构和极性特征有明显差异。【结论】基本培养基、供体母株基因型和外源添加剂都会明显影响杉木体胚诱导培养,以Z1供体母株基因型的杉木雌配子体为外植体、DCR为培养基并组合添加MeJA和TDZ可明显提高杉木体胚诱导率。