转化生长因子-β_1对大鼠脑膜间皮细胞结缔组织因子表达的影响

作     者：李合华 李彤 韩素改 刘传宝 魏丽红 张平 闫海清 常丽 贵永堃 禹萌 LI He-hua;LI Tong;HAN Su-gai;LIU Chuan-bao;WEI Li-hong;ZHANG Ping;YAN Hai-qing;CHANG Li;CUI Yong-kun;YU Meng

作者机构：新乡医学院第一附属医院神经内科河南卫辉453100 

出 版 物：《中华脑科疾病与康复杂志（电子版）》 (Chinese Journal of Brain Diseases and Rehabilitation（Electronic Edition）)

年 卷 期：2011年第1卷第2期

页      面：9-14页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100204[医学-神经病学] 10[医学] 

基　　金：河南省科技厅重大项目资助课题(082102310015) 

主　　题：原代细胞培养 转化生长因子β1 软脑膜 间皮细胞 结缔组织 生长因子 脑膜纤维化 

摘      要：目的观察转化生长因子-β1(TGF-β1)对大鼠软脑膜间皮细胞(RLMCs)结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法体外培养RLMCs,并将其分为4组:(1)0组(正常对照组):用无血清培养基(FSM)培养细胞;(2)1组:用含TGF-β11 ng/ml培养细胞;(3)2组:用含TGF-β12 ng/ml培养细胞;(4)3组:用含TGF-β14 ng/ml培养细胞;各组分别在TGF-β1刺激6、12及24 h后,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定CTGF mRNA水平;蛋白免疫印迹(Western blot)测定CTGF蛋白表达。数据以平均值±标准差(x珋±s)表示,各个浓度点组间比较采用单因素方差分析(One-way ANOVA),两两比较采用最小显著法(LSD)检验,以P0.05有统计学意义。结果在6、12及24 h分别以TGF-β11 ng/mL、2 ng/mL、4 ng/mL处理,CTGF mRNA表达水平与对照组比较,差异具有显著性(F6h=46.549、F12h=287.098、F24h=109.202,P均0.001),呈剂量依赖性,以TGF-β1处理12 h组CTGF mRNA表达差异明显。western blotting:正常对照组RLMCs细胞和不同浓度的TGF-β1刺激后均表达CTGF蛋白,在TGF-β1刺激6、12及24 h后,各组均随着浓度的增加而增加,差异有显著性(F6h=52.988、F12h=95.331、F24h=157.107,P均0.001),呈剂量依赖性,以TGF-β1处理6 h组CTGF蛋白表达差异明显。结论 TGF-β1能诱导RLMCs中CTGF通路激活。TGF-β1刺激RLMCs中CTGF mRNA和蛋白的表达,而且随浓度增加而显著。CTGF可能作为神经系统疾病中抑制脑膜纤维化的靶点而进一步研究。