免疫磁珠分选降低分化体系中胚胎干细胞的比例

作     者：朱宛宛 杜庆安 王淑艳 徐艳玲 关云谦 张愚 ZHU Wan-wan;DU Qing-an;WANG Shu-yan;XU Yan-ling;GUAN Yun-qian;ZHANG Yu

作者机构：首都医科大学宣武医院细胞治疗中心教育部重点实验室北京100053 

出 版 物：《中国生物工程杂志》 (China Biotechnology)

年 卷 期：2009年第29卷第3期

页      面：63-68页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 071009[理学-细胞生物学] 09[农学] 0901[农学-作物学] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家"973"计划(2006CB943703) 北京市科委科技计划(D07050701350703)资助项目 

主　　题：免疫磁珠分选 胚胎干细胞 神经前体细胞 SSEA-1 分化 

摘      要：研究目的:采用免疫磁珠分选系统(magnetic activated cell sorting,MACS)分离去除小鼠胚胎干细胞(murine embryonic stem cells,mES)向神经细胞分化时培养体系中的ES细胞,即对分化细胞进行纯化,以期减少移植致瘤性。方法:诱导mES细胞向神经细胞分化,取分化第四期的细胞,胰酶消化制成单细胞悬液,用mES特异性表面抗原SSEA-1(special stage embryonic antigen-1)单抗标记,间接免疫磁珠分选系统分离去除SSEA-1阳性细胞,流式细胞仪检测分选前后细胞中mES细胞的比例,台盼蓝染色检测分选前后细胞存活率。结果:经MACS分选后的阴性细胞中的SSEA-1阳性率可以由分选前的(7.19±1.36)%下降到(1.34±0.80)%,结果具有显著性差异;分选后的细胞存活率仍为92%左右,与分选前存活率无明显变化。结论用SSEA-1作为表面标志,用MACS方法能有效地去除胚胎干细胞分化细胞中残存的胚胎干细胞,得到高纯度的分化细胞,并且细胞存活率不受影响,为下一步进行移植实验奠定基础。