bak基因干扰在铝致SH—SY5Y细胞凋亡中的作用

作     者：张勤丽 牛侨 牛丕业 ZHANG Qin-li;NIU Pi-ye;NIU Qiao

作者机构：山西医科大学公共卫生学院劳动卫生教研室030001 首都医科大学公共卫生与家庭医学学院劳动卫生与环境卫生学系100069 

出 版 物：《中华劳动卫生职业病杂志》 (Chinese Journal of Industrial Hygiene and Occupational Diseases)

年 卷 期：2008年第26卷第2期

页      面：65-71页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(编号30671777,30740032) 教育部博士点基金资助项目(编号20050114001) 

主　　题：bak基因 RNA干扰 铝 细胞凋亡 

摘      要：目的以铝致神经母细胞瘤细胞（SH—SY5Y）为模型，研究用RNA干扰的方法阻抑bak基因的表达，找到其最优的序列、最适的转染浓度和转染时间，以减少铝引起的神经细胞凋亡。方法将三对bak基因小干扰RNA（siRNA）序列用不同浓度铝染毒细胞，分别测定不同的siRNA序列、不同的转染浓度及不同的转染时间对细胞活力的影响。用荧光染色法计数转染效率，用荧光定量PCR法检测干扰效率，用免疫组织化学染色法测定阻抑Bak蛋白表达效果。最后，用选定的bak siRNAl作用于染铝后的神经瘤细胞，并检测其对细胞的凋亡率及坏死率的影响。结果siRNAI序列为最有效的序列，最适转染浓度为10nmol／L，最适作用时间为转染后24h。siRNA的转染效率〉90％，最大干扰效率为57．76％，并表现了对Bak蛋白表达的明显的阻抑效应。bak siRNAI作用于染铝后的神经瘤细胞，可以明显降低细胞的凋亡率，但对细胞的坏死率的影响并不明显。结论凋亡是铝致SH-SY5Y细胞死亡的重要途径，针对bak基因，用化学法合成siRNA并将其导人神经细胞，可以有效降低bak基因和Bak蛋白的表达，提高细胞活力和降低细胞的凋亡率，为预防及治疗铝诱导的神经细胞凋亡及神经退行性变的发生发展提供理论依据。