鹅源新城疫病毒拯救体系的建立

作     者：胡顺林 张艳梅 孙庆 刘玉良 吴艳涛 刘秀梵 HU Shun-Lin;ZHANG Yan-Mei;SUN Qing;LIU Yu-Liang;WU Yan-Tao;LIU Xiu-Fan

作者机构：扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室扬州225009 

出 版 物：《微生物学通报》 (Microbiology China)

年 卷 期：2007年第34卷第3期

页      面：426-429页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 090601[农学-基础兽医学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家自然科学基金重点项目(No.30630048) 国家科技支撑计划(No.2006BAD06A03) 

主　　题：新城疫病毒 cDNA 转染 拯救 

摘      要：参照GenBank上公布的鹅源新城疫病毒ZJI株全序列,设计8对引物,经RT-PCR法从尿囊液中扩增目的片段后,分别克隆进pCR2.1载体,将Ⅰ～Ⅶ7对引物的扩增片段依次亚克隆到TVT7R转录载体中,构建了含NDV全基因组cDNA的转录载体(pNDVZJI),将Ⅴ、Ⅵ和Ⅷ3对引物的扩增片段分别克隆进pCR2.1载体,并亚克隆到表达质粒pCI-neo上,构建了L基因的真核表达载体(pCI-L),pNDVZJI、pCI-L与另外两个辅助表达质粒(pCI-NP和pCI-P)共转染BSR-T7/5细胞,成功拯救出了具有血凝性的鹅源新城疫病毒,ZJI株鹅源新城疫病毒的成功拯救为后续相关研究工作的开展打下了基础。