冷暖型小麦基因差异的最佳RAPD反应体系研究

作     者：裴国亮 李京敬 王长发 陶士珩 

作者机构：西北农林科技大学生物信息中心陕西杨凌712100 

出 版 物：《安徽农业科学》 (Journal of Anhui Agricultural Sciences)

年 卷 期：2006年第34卷第13期

页      面：2993-2995页

学科分类：09[农学] 0901[农学-作物学] 

主　　题：冷型小麦 RAPD反应体系 稳定性 可靠性 

摘      要：为了建立小麦RAPD反应的最佳体系,保证反应结果的稳定性和可靠性,寻找小麦冷暖型基因差异,降低试验成本,在相同PCR扩增程序(94℃预变性5 min,94℃变性45 s,38℃退火1 min,72℃延伸1.5 min,40个循环,72℃延伸10 min,4℃保存)下,对冷暖型小麦基因组DNA的RAPD扩增体系各参数进行比较筛选,创建其最佳反应体系为:25μl反应体系中,模板DNA 20 ng,10×PCR缓冲液2.5μl,dNTPs 0.2 mmol/L,Taq酶1 U,Mg2+浓度为2.0 mmol/L,ddH2O 12μl,随机引物10 ng。