抗牛传染性鼻气管炎病毒gD蛋白中和活性单克隆抗体的制备及鉴定

作     者：洪家兵 刘文晓 王萍 李永清 HONG Jia-bing;LIU Wen-xiao;WANG Ping;LI Yong-qing

作者机构：江西农业大学动物科学技术学院江西南昌330045 北京市农林科学院畜牧兽医研究所畜禽疫病防控技术北京市重点实验室北京100097 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2019年第49卷第12期

页      面：1514-1519页

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：国家重点研发计划重点专项(2016YFD050095) 北京市奶牛产业创新团队项目(BAIC05-2019) 

主　　题：牛传染性鼻气管炎病毒 gD蛋白 单克隆抗体 

摘      要：为了制备牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)gD蛋白的单克隆抗体,本研究用纯化的IBRV免疫BALB/c小鼠,然后以纯化的昆虫细胞表达的gD蛋白作为ELISA包被抗原筛选杂交瘤细胞株。结果获得3株能够稳定分泌抗gD蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株1B4、3E8和4F12。采用夹心ELISA鉴定单克隆抗体的Ig亚类,结果显示,1B4、3E8为IgG2b,4F12为IgG1。免疫印迹试验与间接免疫荧光试验表明,3株单克隆抗体均能与IBRV发生特异性反应。微量中和试验结果显示,1B4和3E8单克隆抗体具有中和IBRV的活性,中和效价均为1∶320。本研究成功制备了具备中和作用的抗牛传染性鼻气管炎病毒gD蛋白单克隆抗体,为建立特异性的IBRV诊断方法及致病机理的研究提供了工具。