新生期小鼠胰岛分离纯化方法的研究
Isolation and purification of mice pancreatic islets during neonatal period作者机构:南京医科大学第一附属医院内分泌科江苏南京210029
出 版 物:《南京医科大学学报(自然科学版)》 (Journal of Nanjing Medical University(Natural Sciences))
年 卷 期:2013年第33卷第6期
页 面:766-770页
学科分类:1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100101[医学-人体解剖与组织胚胎学] 10[医学]
基 金:国家自然科学基金资助(30971404 81070621 81261120566) 江苏省国际科技合作计划(BZ2011042) 江苏省医学重点人才项目(RC2011068) 江苏省"六大人才高峰"项目(苏人社发【2011】582号)
摘 要:目的:探讨新生期小鼠胰岛分离纯化方案。方法:采用胰腺局部充盈、胶原酶Ⅴ消化,对比不同消化时间及单纯显微镜下手挑胰岛或Histopaque-1077纯化对胰岛得率的影响,并通过胰岛素/胰高血糖素双染后流式细胞术检测胰岛β和α细胞构成比例。结果:在1 mg/ml酶浓度下,1周和3周小鼠胰岛的最适消化时间分别为23 min(胰岛/胰腺38.11±2.78)和25 min(胰岛/胰腺66.06±2.61)。1周以直径90%,且存在β和α细胞构成比例的动态变化(P0.05)。结论:胰腺局部充盈、胶原酶Ⅴ消化后镜下手挑胰岛是一种较好的新生期小鼠胰岛分离纯化方法,消化时间和纯化方法是其重要影响因素。