利用Gateway克隆技术大规模克隆拟南芥转录因子

作     者：梅文倩 宋文强 潘怡 巩威 朱玉贤 

作者机构：北京大学蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室北京100871 

出 版 物：《分子植物育种》 (Molecular Plant Breeding)

年 卷 期：2004年第2卷第3期

页      面：358-364页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家自然基金委员会重大国际合作项目(30221120261)资助 

主　　题：Gateway克隆技术 拟南芥 转录因子 聚类分析 功能基因组 

摘      要：随着越来越多基因组全序列的测定完成,基因组的研究进入了功能研究阶段。功能基因组的研究需要把大量基因连入不同载体,传统的酶切连接构建载体的方法不能满足这种大规模克隆的需要。Gateway技术是一种高效的大规模克隆系统,而且对载体和宿主没有依赖性。本文利用Gateway大规模克隆技术将16个拟南芥转录因子的ORF克隆入植物表达载pPTV和酵母表达载体pYTV中,酵母融合表达实验和West-ern-blot检测证明了该克隆途径的可行性,并且得到的His-Tag融合蛋白,为拟南芥转录因子的大规模蛋白质组学研究奠定了良好的基础,同时基因序列的聚类分析为将来进一步的功能研究提供了有利信息。