人甘露糖结合凝集素在小鼠肝脏细胞内表达

作     者：金振晓 刘维永 胡军 胡巧侠 

作者机构：第四军医大学西京医院心血管外科中心西安710032 

出 版 物：《中国免疫学杂志》 (Chinese Journal of Immunology)

年 卷 期：2002年第18卷第12期

页      面：828-831页

核心收录：

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 10[医学] 

主　　题：肝脏细胞 甘露糖结合凝集素 基因表达 MBL PCR方法 

摘      要：目的 :在小鼠肝脏组织中表达人甘露糖结合凝集素 (mannose bindinglectin ,MBL)。方法 :采用PCR方法从pGEMT MBL质粒中扩增人MBLcDNA序列 ,克隆入pUC19载体中 ,限制性酶切鉴定及测序正确后 ,将MBLcDNA克隆入真核表达载体pcDNA3质粒中 ,构建成pcDNA3 MBL质粒 ,经尾静脉大容量快速注射pcDNA3 MBL质粒 2 0 μg,8h后处死小鼠 ,WesternBlot方法检测小鼠肝脏组织和血清中人MBL ,免疫组织化学方法检测小鼠肝脏组织中人MBL的表达情况。结果 :成功扩增出人MBLcDNA序列并构建克隆载体pUC19 MBL ,测序结果正确 ,成功构建pcDNA3 MBL真核表达载体。小鼠尾静脉注射pcDNA3 MBL质粒后 8h ,免疫组化检测证实肝细胞中有人MBL表达 ,Westernblot方法检测发现血清和肝脏组织中出现人MBL蛋白。结论 :真核表达载体pcDNA3 MBL裸质粒DNA静脉注射可以在小鼠肝脏中大量表达人MBL ,并分泌入血 ,为临床纠正先天性低MBL患者的易感染状态提供了新的思路。