DNA聚合酶δ相互作用蛋白1能促进GFP蛋白的降解

作     者：张波 周芳亮 卢芳国 严杰 张健 

作者机构：湖南中医药大学医学院湖南长沙410208 湖南师范大学生命科学院教育部蛋白质化学与发育生物学重点实验室 

出 版 物：《细胞与分子免疫学杂志》 (Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology)

年 卷 期：2014年第30卷第4期

页      面：363-365,370页

核心收录：

学科分类：090502[农学-动物营养与饲料科学] 1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 0905[农学-畜牧学] 09[农学] 100102[医学-免疫学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81072751) 湖南省高校科技创新团队资助项目(编号15) 湖南省重点学科<中西医综合基础>建设项目(100602) 

主　　题：DNA聚合酶δ相互作用蛋白1 绿色荧光蛋白 降解 HEK293细胞 

摘      要：目的证明过表达DNA聚合酶δ相互作用蛋白1(PDIP1)能否促进外源性GFP蛋白的降解。方法将HEK293细胞共转染表达质粒pEGFP-C3与pCMV-myc-PDIP1,利用荧光显微镜检测细胞绿色荧光强度,然后利用Western blot法检测GFP与PDIP1蛋白表达量的关系,再利用氯化铵与MG132分别进行干预,并检测GFP与PDIP1蛋白表达量的关系。结果共转染表达质粒pEGFP-C3与pCMV-myc-PDIP1的HEK293细胞绿色荧光强度明显低于单转pEGFP-C3质粒的细胞;随着PDIP1蛋白表达量的增大,GFP蛋白的表达量减少;利用MG132干预可以明显抑制PDIP1对GFP的降解,而氯化铵干预没有显示明显的效应。结论过表达PDIP1可以促进外源性GFP蛋白的降解,且这一降解是通过蛋白酶体途径进行的,提示PDIP1可能参与细胞内某些蛋白的泛素化降解。