稳定干扰鸟苷酸环化酶C基因表达的人胃腺癌细胞株的筛选和建立

作     者：张健锋 印红军 张弘 朱惠君 毛振彪 ZHANG Jianfeng;YIN Hongjun;ZHANG Hong;ZHU Huijun;MAO Zhenbiao

作者机构：南通大学附属医院消化内科226000 南通大学附属医院消化病实验室 南通大学附属医院病理科 

出 版 物：《胃肠病学》 (Chinese Journal of Gastroenterology)

年 卷 期：2011年第16卷第7期

页      面：429-431页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：南通市社会发展基金项目(No.S2008015)资助 

主　　题：鸟苷酸环化酶 RNA干扰 胃肿瘤 

摘      要：背景:正常胃黏膜组织不表达肠上皮细胞特异性受体鸟苷酸环化酶C(GC-C),但肠化生、异型增生和胃腺癌组织存在GC-C异位表达。目的:筛选并建立GC-C特异性短发夹RNA(shRNA)稳定转染的胃腺癌细胞株。方法:构建靶向GC-C基因的shRNA表达载体,以脂质体法转染胃腺癌细胞株SGC-7901,实时荧光定量RT-PCR和蛋白质印迹法分别检测GC-C mRNA和蛋白表达。G418筛选阳性克隆并建立GC-C shRNA稳定转染的SGC-7901细胞株,并行RT-PCR鉴定。结果:GC-C shRNA可抑制SGC-7901细胞株的GC-C基因表达,以GC-C sh3的抑制效果最佳,转染48 h后的GC-CmRNA和蛋白沉默率分别为77.0%和62.2%。有效筛选并建立了GC-C shRNA稳定转染的SGC-7901细胞株,GC-CmRNA沉默率为65.3%。结论:成功建立了GC-C shRNA稳定转染的SGC-7901细胞株,为下一步研究奠定了基础。