辐射诱导表达载体pEgr-p16的构建及其体外蛋白表达的研究

作     者：刘建香 苏旭 LIU Jian-xiang;SU Xu

作者机构：中国疾病预防控制中心辐射防护与核安全医学所北京100088 

出 版 物：《中华放射医学与防护杂志》 (Chinese Journal of Radiological Medicine and Protection)

年 卷 期：2005年第25卷第5期

页      面：416-419页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：中国科学院近代物理研究所重离子加速器国家实验室课题基金资助 

主　　题：辐射诱导 表达载体 pEgr-p16 体外表达 蛋白表达 基因治疗 放射治疗 肿瘤 γ射线 

摘      要：目的构建辐射诱导表达载体pEgrp16并研究其体外稳定转染联合60Coγ射线照射对人宫颈癌HeLa细胞p16蛋白表达变化的影响。方法利用双酶切、粘端连接的方法构建了含有辐射诱导特性的早期生长反应因子Egr1和p16的pEgrp16的质粒载体,以脂质体介导的方法,将重组载体导入人HeLa细胞,采用免疫细胞化学和流式细胞术的方法检测照射转染后的HeLa细胞p16蛋白表达的变化。结果经全自动测序证明辐射诱导表达载体pEgrp16构建正确;稳定转染可见有明显的p16表达增强;5Gy以内p16蛋白表达呈剂量依赖性的增加,在2Gy照射后2hp16蛋白表达水平即开始增高,4h达到最高,12h趋于正常水平。结论本研究成功构建了辐射诱导表达载体pEgrp16,在HeLa细胞中蛋白表达明显增强。