叶酸和维生素B12在同型半胱氨酸诱导人脐静脉内皮细胞凋亡中的作用

作     者：马鹏俊 张鸣号 郭伟 马胜超 孙磊 李桂忠 姜怡邓 MA Peng-jun;ZHANG Ming-hao;GUO Wei;MA Sheng-chao;SUN Lei;LI Gui-zhong;JIANG Yi-deng

作者机构：宁夏医科大学临床学院宁夏银川750004 宁夏血管损伤与修复研究重点实验室宁夏银川750004 宁夏医科大学基础学院宁夏银川750004 

出 版 物：《中国病理生理杂志》 (Chinese Journal of Pathophysiology)

年 卷 期：2019年第35卷第11期

页      面：1951-1956页

核心收录：

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100101[医学-人体解剖与组织胚胎学] 100104[医学-病理学与病理生理学] 10[医学] 

基　　金：宁夏高等学校科学研究项目(No.NGY2016088) 

主　　题：同型半胱氨酸 叶酸 维生素B12 哺乳动物不育系20样激酶1 DNA甲基化 

摘      要：目的:探讨叶酸和维生素B12在同型半胱氨酸(Hcy)通过哺乳动物不育系20样激酶1(MST1)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡中的作用及机制。方法:将HUVECs分为3组,分别为对照组(0μmol/L Hcy)、Hcy组(100μmol/L Hcy)和干预组(100μmol/L Hcy+30μmol/L叶酸+30μmol/L维生素B12)。细胞处理72 h后,流式细胞术检测HUVECs的凋亡率;荧光倒置显微镜观察DNA甲基转移酶1(DNMT1)过表达腺病毒转染的效率;RT-qPCR和Western blot分别检测MST1及DNMT1的mRNA和蛋白表达水平;巢式甲基化特异性PCR法检测MST1启动子区的甲基化水平。结果:与正常对照组比较,Hcy组HUVECs的凋亡率升高(P0.01),MST1的mRNA(P0.01)与蛋白(P0.05)表达水平明显增加,DNMT1的mRNA水平降低(P0.01);而叶酸和维生素B12干预可明显抑制Hcy引起的HUVECs凋亡、MST1 mRNA水平升高(P0.01)及DNMT1 mRNA水平降低(P0.01),MST1的mRNA水平与HUVECs凋亡率呈正相关(r=0.943 9,P0.001)。转染DNMT1过表达腺病毒后,可见HUVECs中大量绿色荧光蛋白表达;同时,DNMT1的mRNA和蛋白表达(P0.01)以及MST1启动子区的DNA甲基化水平明显增加(P0.01),而MST1的蛋白水平下降(P0.01)。结论:MST1表达增加可以诱导HUVECs凋亡,而叶酸和维生素B12在缓解Hcy介导的HUVECs凋亡中发挥重要作用,其保护机制可能是通过上调MST1启动子区DNA甲基化实现的。这将为进一步研究动脉粥样硬化的发病机制提供理论依据。