肿瘤相关成纤维细胞的生物学特征及Transwell共培养对胃癌细胞生长和转移的影响

作     者：邵久针 王颖钰 印鑫 许尤琪 沈明勤 SHAO Jiu-zhen;WANG Ying-yu;Yin Xin;XU You-qi;SHEN Ming-qin

作者机构：南京中医药大学附属中西医结合医院中药药理毒理实验室江苏南京210028 江苏省中医药研究院中药药理毒理实验室江苏南京210028 江苏省第二中医院肿瘤科江苏南京210008 

出 版 物：《中国药理学通报》 (Chinese Pharmacological Bulletin)

年 卷 期：2019年第35卷第11期

页      面：1582-1589页

核心收录：

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100101[医学-人体解剖与组织胚胎学] 10[医学] 

基　　金：江苏省自然科学基金资助项目(No BK20161605) 江苏省研究生科研与实践创新计划项目(No SJCX19_0343) 

主　　题：胃癌 肿瘤相关成纤维细胞 原代培养 Transwell共培养 异质性 反Warburg效应 

摘      要：目的 培养原代人胃癌相关成纤维细胞(cancer associated fibroblasts,CAFs)和正常成纤维细胞(normal fibroblasts,NFs),探究生物学特性及对胃癌细胞影响。方法 CAFs和NFs分离培养后,MTT法绘制生长曲线,免疫荧光法、Western blot、qRT-PCR检测α-SMA和Vimentin表达。MGC-803与CAFs、NFs进行Transwell共培养,Transwell法检测胃癌迁移和侵袭,MTT法比较细胞活力及AMD3100影响,pH计、乳酸酶法、DCFH-DA法测定共培养体系酸化、乳酸及活性氧(ROS)含量。结果 CAFs、NFs呈长梭形、多角形等,CAFs增殖和重叠生长现象均高于NFs。CAFs细胞α-SMA和Vimentin为阳性表达,而NFs为低表达或阴性。胃癌细胞活力低密度共培养组中密度组高密度组,CAFs共培养体系出现pH值降低,乳酸、ROS含量高现象,且只有CAFs-低密度共培养组促癌效果明显。结论 胃癌细胞与CAFs、NFs共培养受比例影响较大,低密度共培养更能明显提高胃癌细胞的增殖和迁移能力,而高密度共培养可能会反过来抑制肿瘤细胞的增长和转移,可能与乳酸、ROS含量有关。