负载pcDNA3.1-EGFP壳聚糖纳米颗粒的制备及其生物学特性分析
Generation and characterization of a pcDNA3.1-EGFP plasmid delivery system based on chitosan-nanoparticles作者机构:扬州大学医学院免疫学教研室江苏扬州225001 扬州大学医学院药剂学教研室江苏扬州225001
出 版 物:《实用临床医药杂志》 (Journal of Clinical Medicine in Practice)
年 卷 期:2013年第17卷第17期
页 面:1-4页
学科分类:1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 10[医学]
基 金:国家自然科学基金(81172785 30671917) 江苏省自然科学基金(BK2011449 BK2008215) 国家级大学生创新创业训练计划 江苏省大学生科技创新基金资助项目
摘 要:目的 制备并鉴定负载pcDNA3.1-EGFP质粒的纳米颗粒,观察其细胞转染效率及细胞毒性.方法 首先将壳聚糖和质粒DNA按不同质量比混合,制备成纳米颗粒,计算其包封率,测定其粒径和Zeta电位.其次分别将纳米颗粒与RAW264.7和CT-26细胞孵育,荧光显微镜观察2两种细胞内绿色荧光蛋白的表达,流式细胞仪检测荧光细胞的频率.最后利用MTS/PMS法检测纳米颗粒对RAW264.7和CT-26细胞的毒性.结果 质粒DNA被壳聚糖纳米颗粒高效负载,粒径分布在100~300 nm之间,携带正电荷,被哺乳动物细胞有效摄取并表达,对细胞没有明显毒性.结论 负载DNA的壳聚糖纳米颗粒可用于重组基因疫苗的运送,可用于疾病的预防或治疗.