富集兔毛囊干细胞构建组织工程化尿道的研究
Study on constructing tissue engineered urethra by enriched rabbit hair follicle stem cells作者机构:南方医科大学附属珠江医院泌尿外科广州510515 中山市博爱医院泌尿外科中山528403 中山市古镇医院泌尿外科中山528400
出 版 物:《上海交通大学学报(医学版)》 (Journal of Shanghai Jiao tong University:Medical Science)
年 卷 期:2013年第33卷第3期
页 面:285-289页
核心收录:
学科分类:0710[理学-生物学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100101[医学-人体解剖与组织胚胎学] 10[医学]
摘 要:目的富集兔毛囊干细胞构建组织工程化尿道,观察其对尿道缺损的修复效果。方法应用机械分离与酶消化法分离培养兔毛囊细胞,体外原代培养扩增至3×106个,采用流式细胞仪富集毛囊干细胞,分选直径10μm的integrin-α6+/cd71-细胞,免疫荧光法检测细胞K19、p63和β1整合素表达。将毛囊干细胞接种于膀胱脱细胞基质支架材料上,构建组织工程化尿道,扫描电子显微镜观察细胞在支架上的分布状态。利用组织工程化尿道修复2.5 cm的兔尿道缺损,经尿道造影和组织学检查观察缺损修复效果。结果免疫荧光法检测结果显示毛囊干细胞K19、p63、β1整合素表达阳性。扫描电子显微镜观察发现细胞与支架紧密贴附,细胞伸展适度且有基质分泌。组织学检查和免疫组织化学检测发现,毛囊干细胞形成复层上皮结构,AE1/AE3染色阳性。组织工程化尿道修复缺损后3个月,尿道造影显示尿道平滑通畅。结论通过调整优化分选参数富集兔毛囊干细胞,构建的组织工程化尿道可用于修复兔尿道缺损。