根癌农杆菌介导马铃薯试管薯转化体系的优化及AtNHX1基因的导入

作     者：王丽 杨宏羽 张俊莲 王蒂 

作者机构：甘肃省作物遗传改良与种质创新重点实验室 

出 版 物：《西北植物学报》 (Acta Botanica Boreali-Occidentalia Sinica)

年 卷 期：2008年第28卷第6期

页      面：1088-1094页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家科技支撑计划(2006BAD21B05) “973”计划(2006CB708203) 国家“863”计划 甘肃省农业生物技术(GNSW-2006-01) 

主　　题：马铃薯 根癌农杆菌 转化 AtNHX1基因 转基因植株 

摘      要：以马铃薯栽培品种甘农薯2号的试管薯薄片为转化受体材料,通过根癌农杆菌LBA4404介导拟南芥液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白基因(AtNHX1)进行转化,获得了抗卡那霉素的再生植株,并对转化植株进行了PCR-Southern检测.结果表明,薯片分化和根再生的卡那霉素选择压为50mg/L;乙酰丁香酮对薯片转化率无影响;优化的试管薯片转化方法是:不经预培养的薯片用OD600值为0.5的菌液侵染8～10min,然后经过2d共培养,在抗性芽分化培养基上生长40d,可获得30%卡那抗性绿苗.对抗性植株的PCR和PCR-Southern检测证明,外源At-NHX1基因已整合到马铃薯基因组中.