红豆杉内生真菌发酵培养基和原生质体制备酶系统的筛选

作     者：周选围 王子楠 魏雅敏 蒋科技 林娟 孙小芬 谈锋 苗志奇 唐克轩 ZHOU Xuanwei;WANG Zinan;WEI Yamin;JIANG Keji;LIN Juan;SUN Xiaofen;TAN Feng;MIAO Zhiqi;TANG Kexuan

作者机构：上海交通大学农业与生物学院植物生物技术研究中心 复旦大学生命科学学院遗传工程国家重点实验室上海200433 西南师范大学生命科学学院现代生物医药研究所重庆400715 

出 版 物：《应用与环境生物学报》 (Chinese Journal of Applied and Environmental Biology)

年 卷 期：2006年第12卷第2期

页      面：176-181页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 0907[农学-林学] 07[理学] 08[工学] 0829[工学-林业工程] 09[农学] 071005[理学-微生物学] 10[医学] 

基　　金：国家"863计划"高技术项目(2005AA212190)~~ 

主　　题：内生真菌 培养基 酶系统 原生质体 再生 

摘      要：在对红豆杉内生真菌(Ozoniumsp.)适生碳源、氮源和生长情况研究的基础上,通过正交试验筛选了其发酵培养基和原生质体制备的酶系统;用L9(34)安排了四因素三水平并考虑交互作用的正交试验,对实验结果进行了分析.结果表明,最优的发酵培养基为果糖1%、蔗糖1%、蛋白胨0.2%、酵母粉0.5%、KH2PO40.5%、MgSO4·7H2O0.3%、VB10.001%;分离原生质体的最优酶系统为1.5%溶壁酶+0.5%蜗牛酶+1.5%纤维素酶+1.0%溶菌酶;用此酶系统在30℃条件下酶解3h,原生质体的产量达6.55×107个/mL酶液;经荧光素二醋酸酯(FDA)染色评估原生质体活力,表明该条件下分离的原生质体活力较高,原生质体的再生率为2.56%.该研究为利用生物技术手段改良紫杉醇生产菌奠定了基础.