人瘢痕疙瘩成纤维细胞Smad2特异siRNA的制备和活性鉴定

作     者：高中玉 林子豪 汪滋民 江华 袁湘斌 赵耀忠 吴宏 史毅 金由辛 

作者机构：第二军医大学长征医院整形外科上海200003 第二军医大学长海医院骨科上海200433 中国科学院上海生物科学院生物化学与细胞生物学研究所分子生物学国家重点实验室上海200031 

出 版 物：《第二军医大学学报》 (Academic Journal of Second Military Medical University)

年 卷 期：2005年第26卷第1期

页      面：34-37页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100210[医学-外科学(含：普外、骨外、泌尿外、胸心外、神外、整形、烧伤、野战外)] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(30300369 004119065) 

主　　题：RNA干扰 Smad2 瘢痕疙瘩 成纤维细胞 

摘      要：目的:探讨应用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)特异性抑制人瘢痕疙瘩成纤维细胞内Smad2 基因表达,筛选高效特异性siRNA。方法:根据siRNA设计原则,针对人Smad2 基因序列特征设计Smad2 特异siRNA(1 3),转染瘢痕疙瘩成纤维细胞,RT PCR检测siRNA对Smad2 基因的抑制效果。结果:Smad2 siRNA 3 可有效抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞中Smad2 基因的表达。随siRNA 3 终浓度由50 nmol/L增加到100 nmol/L 及200 nmol/L,抑制效率逐渐增强(P0.05);siRNA 3以终浓度200 nmol/L转染后24 h抑制效果最强,48 h 逐渐减弱,但仍明显抑制(P 0. 05)。结论:应用RNA干扰技术可抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞中Smad2 基因的表达,其抑制作用具有明显的时间、浓度依赖性。