microRNA - 7基因敲减对小鼠CD4~+ SP细胞胸腺发育的影响
Influence of microRNA-7 knock down on development of CD4~+ SP cells in murinethymus作者机构:贵州省遵义医学院免疫学教研室暨贵州省生物治疗人才基地 遵义 563000
出 版 物:《中国免疫学杂志》
年 卷 期:2015年第31卷第9期
页 面:1173-1177页
基 金:国家教育部新世纪优秀人才支持计划
主 题:微小RNA-7 基因敲减 胸腺 CD4~+ SP细胞
摘 要:目的:研究microRNA-7(miRNA-7,miR-7)基因敲减对小鼠CD4~+ SP细胞胸腺发育的影响。方法:检测miR-7基因敲减(miR-7 knock down,miR-7KD)和野生型(Wild-type,WT)小鼠胸腺重量及细胞总数变化; HE染色观察miR-7KD小鼠胸腺的形态学结构改变; FACS检测胸腺CD4~+单阳性(Single positive,SP)细胞的比例并计算细胞总数,同时检测CD4~+ SP细胞CD44及CD62L表达变化;核抗原Ki-67染色法检测CD4~+ SP细胞的增殖情况; FACS检测CD4~+ SP细胞的凋亡变化; Western blot技术检测胸腺中总ERK1/2和磷酸化ERK1/2表达水平变化。结果:与WT小鼠相比,miR-7KD小鼠胸腺体积、重量以及细胞总数均显著减少,且形态学结构发生改变(P 0.05); FACS结果显示,miR-7KD小鼠胸腺CD4~+ SP细胞比例明显降低,且细胞总数减少(P 0.05)。此外,CD4~+ SP细胞的CD44表达水平显著增加,而CD62L表达水平明显减少(P 0.05);同时, CD4~+ SP细胞增殖及凋亡比例均显著增加(P 0.01);最后,miR-7KD小鼠胸腺中ERK1/2以及磷酸化ERK1/2的表达均明显下调(P 0.05)。结论: miR-7基因敲减后可显著影响CD4+ SP细胞的胸腺发育,这可能与细胞活化水平及ERK1/2信号通路改变有关。