利用RNAi技术抑制马铃薯类受体激酶基因(StRLK)表达的研究

作     者：朱云 樊娜娜 于耀华 张柏顺 杨煜 晁祥建 郭宝太 金黎平 郭晓 李广存 ZHU Yun;FAN Na-na;YU Yao-hua;ZHANG Bai-shun;YANG Yu;CHAO Xiang-jian;GUO Bao-tai;JIN Li-ping;GUO Xiao;LI Guang-cun

作者机构：青岛农业大学生命科学院山东青岛266109 山东省农业科学院蔬菜研究所国家蔬菜改良中心山东分中心山东省设施蔬菜分子生物学重点实验室山东济南250100 中国农业科学院蔬菜花卉研究所北京100081 

出 版 物：《华北农学报》 (Acta Agriculturae Boreali-Sinica)

年 卷 期：2012年第27卷第4期

页      面：18-22页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：现代农业产业技术体系专项资金资助(CARS-10-ES10) 国家科技支撑项目(2012BAD02B05) 山东省自然科学基金项目(Y2007D24 ZR2010CQ025) 人力资源和社会保障部留学回国人员科技活动项目择优资助项目 

主　　题：二倍体马铃薯 StRLK基因 遗传转化 RNA干扰 

摘      要：植物类受体蛋白激酶(Receptor-like protein kinase,RLK)是蛋白激酶的一个亚家族,参与植物的信号转导,在植物生长发育、抗病等过程中起重要作用。在前期研究中自二倍体马铃薯高抗青枯病基因型ED13中获得了类受体蛋白激酶基因StRLK。利用StRLK基因的特异区段,以pUCCRNAi为中间克隆载体、pCHF1为植物表达载体,构建了该基因的RNA干扰载体pCHF1-StRLK。进一步以ED13的茎段为外植体,利用农杆菌介导法将pCHF1-StRLK导入ED13中,获得了5株再生植株。用CaMV35S启动子特异引物对5株再生植株进行PCR扩增,均得到大小约500 bp的特异性条带,初步证明pCHF1-StRLK成功转入ED13。以ED13为对照,利用StRLK基因的特异引物对这5株再生植株进行半定量RT-PCR分析,结果表明,该基因的表达在5个转基因植株中均受到了不同程度的抑制,说明导入的pCHF1-StRLK发挥了干扰活性,且干扰效果与基因的插入位点有关,为进一步研究StRLK基因的功能提供依据。