微孔板化学发光酶免疫分析法分析人血清中游离前列腺特异性抗原

作     者：石根 唐宝军 王栩 赵利霞 林金明 Shi Gen;Tang Bao-Jun;Wang Xu;Zhao Li-Xia;Lin Jin-Ming

作者机构：中国科学院生态环境研究中心环境化学与生态毒理学国家重点实验室 北京科美东雅生物技术有限公司研发部  3. 清华大学化学系 

出 版 物：《分析化学》 (Chinese Journal of Analytical Chemistry)

年 卷 期：2007年第35卷第11期

页      面：1541-1547页

核心收录：

学科分类：1010[医学-医学技术（可授医学、理学学位）] 0703[理学-化学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(No20621703) 中国科学院人事局人才引进项目的支持 

主　　题：游离前列腺特异抗原 前列腺癌 化学发光酶免疫分析 肿瘤标志物 

摘      要：建立了一种定量分析人血清中游离前列腺特异性抗原(f-PSA)的高灵敏度微孔板化学发光酶免疫分析方法,以碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)为标记酶,4-甲氧基-4-(3″-磷酰氧基苯)-螺旋-(1,2-二氧杂环丁烷-3,2′-金刚烷)(4-methoxy-4-(3″-phosphate-phenyl)-spiro-(1,2-dioxetane-3,2′-adamantane),AMPPD)-ALP高灵敏的化学发光反应为检测体系,通过检测发光强度对人血清中f-PSA进行定量。对几种物理化学参数如温育时间、免疫反应步骤以及检测时间等进行了优化,采用了一步双抗体夹心法,37℃恒温静置温育2h,洗涤后加入50μL AMPPD,3080min内检测。该方法线性范围为0.1520μg/L,相关系数大于0.998;检出限可达0.01μg/L,批内和批间相对标准偏差(C.V.)均小于7%;回收率在88%108%之间。对人体血清中共存的6种常见肿瘤标志物CA50、CA125、CA15-3、CA242、CEA和AFP的偶联反应进行考察,特异性良好。为了验证该方法用于商业试剂盒的可行性,在4℃和37℃条件下分别进行了3d,5d,7d的稳定性考察,其线性相关系数仍均大于0.998,相对标准偏差小于6%。对98例实际血样进行测定,并与进口试剂盒(***)作临床比对,相关性良好。这些结果均表明,该分析体系稳定,可靠,可以用于商业化试剂盒的开发,在临床分析人血清中f-PSA的辅助诊断前列腺癌方面具有很高的应用价值。