基质交联分子1对前列腺癌DU145细胞迁移侵袭及上皮-间充质转化的影响

作     者：顾鹏 周毅彬 阳东荣 单玉喜 薛波新 Gu Peng;Zhou Yibin;Yang Dongrong;Shan Yuxi;Xue Boxin

作者机构：苏州大学附属第二医院泌尿外科215004 

出 版 物：《中华实验外科杂志》 (Chinese Journal of Experimental Surgery)

年 卷 期：2014年第31卷第6期

页      面：1225-1227页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：苏州市科技发展计划指导项目(SYSD2012084) 

主　　题：前列腺肿瘤 基质交联分子1 肿瘤转移 上皮-间充质转化 

摘      要：目的观察基质交联分子1（STIM1）对前列腺癌DU145细胞迁移、侵袭的影响并探讨其在上皮-间充质转化（EMT）过程中的作用。方法将携带STIM1基因的小干扰RNA（siRNA）慢病毒载体STIM1-pGCSIL-GFP转染人激素非依赖性前列腺癌DU145细胞（KD组），同时设阴性对照组（NC组）及空白对照组（CON组）。逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）及Westernblot验证抑制STIM1表达的有效性。采用划痕实验及Transwell迁移、侵袭实验检测抑制STIM1对肿瘤细胞运动及迁移、侵袭能力的影响。采用半定量RT-PCR及Westernblot分别在mRNA及蛋白水平检测EMT标志物E-钙黏蛋白（E-cadherin）、波动蛋白（Vimentin）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）在各组细胞中的差异。结果与对照组比较，转染STIM1-pGCSIL—GFP后，DU145细胞内STIM1的mRNA及蛋白水平均明显降低。划痕实验显示KD组DU145细胞的运动能力明显降低。细胞迁移结果显示，CON、NC、KD组每个视野细胞数分别为（92．0±14．2）、（87．3±2．3）、（60．8±10．3）个，KD组数目明显减少（P〈0．05）；细胞侵袭实验提示，CON、NC、KD组每视野细胞数分别为（79．6±3．7）、（80．0±3．5）、（45．8±5．8）个，KD组侵袭数目明显减少（P〈0．05）。RT-PCR和Westernblot结果显示，KD组上皮标志物E—cadherin mRNA及蛋白表达水平增高（分别为NC组的1．38、1．72倍）；间质标志物Vimentin的mRNA及蛋白表达水平降低（分别为NC组的0．67、0．74倍），α-SMA mRNA及蛋白表达水平降低（分别为NC组的0．23、0．54倍，P〈0．05）。结论抑制前列腺癌DU145细胞中STIM1表达后，细胞运动及迁移、侵袭能力均明显降低，这可能与逆转EMT相关。