SD大鼠少突胶质前体细胞的纯化及氧糖剥夺对其活性的影响

作     者：莫思思 朱丽华 李棒棒 疏佳萍 乔立兴 MO Sisi;ZHU Lihua;LI Bangbang;SHU Jiaping;QIAO Lixing

作者机构：东南大学医学院江苏南京210009 江苏卫生健康职业学院江苏南京210029 皖南医学院第一附属医院/戈矶山医院安徽芜湖241001 东南大学附属中大医院江苏南京210009 

出 版 物：《东南大学学报（医学版）》 (Journal of Southeast University(Medical Science Edition))

年 卷 期：2019年第38卷第4期

页      面：572-578页

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100104[医学-病理学与病理生理学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(81601355) 江苏妇幼保健项目(F201555) 江苏省研究生培养创新工程研究生科研与实践创新计划项目(SJCX18_0070) 

主　　题：少突胶质前体细胞 细胞纯化 糖氧剥夺模型 SD大鼠 

摘      要：目的:纯化少突胶质前体细胞,并探讨氧糖剥夺不同时间对其活力的影响。方法:取SD乳鼠的脑皮质,采用差速贴壁、振荡分离纯化、限定培养基定向培养法,获取少突胶质前体细胞。镜下观察少突胶质前体细胞分化过程中各阶段细胞的形态变化。采用特异性抗体A2B5、MBP、GFAP、IBA - 1标记纯化后少突胶质前体细胞、成熟少突胶质细胞、星形胶质细胞和小胶质细胞所占比例,以此分析纯化后的细胞纯度。体外制备细胞氧糖剥夺(oxygen glucose deprivation,OGD)模型,采用CCK - 8法观察其对少突胶质细胞系增殖活性的影响。结果:(1)利用针对少突胶质前体细胞、成熟少突胶质细胞、星形胶质细胞和小胶质细胞的特异性抗体A2B5、MBP、GFAP和IGB - 1进行标记,A2B5、MBP染色阳性细胞分别占96.2%、2.1%,GFAP和IBA - 1染色阳性细胞小于3%。(2) MTT检测显示,随着OGD干预时间的延长,细胞活力呈降低的趋势。结论:(1)联合应用差速贴壁、恒温振荡分离和条件限定培养基可以获得高纯度的少突胶质前体细胞;(2)干预 3 h 适宜用于体外少突胶质前体细胞的OGD模型。体外建立的OGD模型可导致少突胶质前体细胞的损伤,使其细胞活性下降。