萝卜硫素干预纳米细菌诱导肾小管上皮细胞凋亡及线粒体自噬相关蛋白的表达
Effects of sulforaphane on mitophagy-related proteins in nanobacteria-induced renal tubular epithelial cell apoptosis作者机构:恩施土家族苗族自治州中心医院感染管理科湖北省恩施市445000 恩施土家族苗族自治州中心医院泌尿外科湖北省恩施市445000
出 版 物:《中国组织工程研究》 (Chinese Journal of Tissue Engineering Research)
年 卷 期:2019年第23卷第34期
页 面:5503-5507页
学科分类:1002[医学-临床医学] 1010[医学-医学技术(可授医学、理学学位)] 100215[医学-康复医学与理疗学] 10[医学]
主 题:萝卜硫素 肾小管上皮细胞 纳米细菌 线粒体自噬 细胞凋亡 Bax Bcl-2 LC3-Ⅱ LC3-Ⅰ
摘 要:背景:萝卜硫素能改善肾小管上皮细胞氧化应激损伤,抑制细胞凋亡,对肾小管上皮细胞损伤作用具有保护作用,但萝卜硫素对肾小管上皮细胞线粒体自噬的影响还有待研究。目的:验证萝卜硫素对纳米细菌诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)凋亡及线粒体自噬相关蛋白表达的影响。方法:研究方案的实施符合恩施土家族苗族自治州中心医院对研究的相关伦理要求。纳米细菌取自恩施土家族苗族自治州中心医院泌尿外科临床确诊肾结石且未服药或手术患者的尿液,患者对实验方案完全知情同意。将人肾小管上皮细胞HK-2分为3组:对照组、纳米细菌组及萝卜硫素干预组(给予纳米细菌刺激同时加30μmol/L萝卜硫素)。采用CCK-8法检测HK-2细胞相对存活率,流式细胞仪检测HK-2细胞凋亡率,Western Blot方法检测凋亡相关蛋白(Bax和Bcl-2)及同源性磷酸酶张力蛋白诱导的激酶1(PINK1)/帕金蛋白(Parkin)介导的线粒体自噬相关蛋白PINK1、Parkin、LC3-Ⅱ、LC3-Ⅰ的表达。结果与结论:①萝卜硫素能有效改善纳米细菌对HK-2细胞增殖的抑制作用(P0.05);②纳米细菌可上调促凋亡蛋白Bax表达,下调抗凋亡蛋白Bcl-2表达,诱导线粒体自噬相关蛋白PINK1、Parkin的表达及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值上升(P0.05);而萝卜硫素处理可明显下调促凋亡蛋白Bax表达,上调抗凋亡蛋白Bcl-2表达,抑制PINK1、Parkin蛋白表达及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值(P0.05);③结果说明,萝卜硫素可抑制纳米细菌诱导的肾小管上皮细胞HK-2的凋亡,缓解其由PINK1/Parkin介导的线粒体自噬。