第208位异亮氨酸对人细胞色素P4502A6尼古丁代谢活性的影响

作     者：何晓阳 王守林 徐旭 Clifford WEISEL 洪钧言 HE Xiao-Yang;WANG Shou-Lin;XU Xu;Clifford WEISEL;HONG Jun-Yan

作者机构：深圳大学生命科学学院广东深圳518060 南京医科大学公共卫生学院毒理系江苏南京210029 Environmental Biomarker Shared Resourcethe Cancer Institute of New Jersey/Environmental and Occupational Health Sciences InstituteNJ 08854USA Global Clinical Pharmacokinetics&Clinical PharmacologyJohnson&Johnson Pharmaceutical Research&DevelopmentL.L.C.NJ 08869USA School of Public Health/Environmental and Occupational Health Sciences InstituteUniversity of Medicine and Dentistry of New JerseyNJ 08854USA 

出 版 物：《中国药理学与毒理学杂志》 (Chinese Journal of Pharmacology and Toxicology)

年 卷 期：2009年第23卷第6期

页      面：464-471页

核心收录：

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100706[医学-药理学] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：美国国立卫生研究院基金资助项目(RO1-ES10048) 美国国立环境卫生研究所资助项目(ES05022)~~ 

主　　题：细胞色素P450 CYP2A6 细胞色素P450 CYP2A13 尼古丁 

摘      要：目的探讨人体尼古丁主要代谢酶细胞色素P450(CYP)2A6及其同族成员CYP2A13肽链结构中,影响其尼古丁5′-羟化代谢活性的关键性氨基酸残基。方法使用前期制备的CYP2A6和CYP2A13系列氨基酸互换突变体:CYP2A6V117A,CYP2A6G164H,CYP2A6I208S,CYP2A6R372H和CYP2A6S465P以及CYP2A13A117V,CYP2A13H164G,CYP2A13S208I,CYP2A13H372R和CYP2A13P465S,比较其与相应野生蛋白酶的尼古丁5′-羟化催化反应的动力学参数。结果各突变体对2个CYP2A蛋白酶的尼古丁代谢活性影响不同。对于CYP2A6,I208S突变对酶活性的影响显著,导致表观反应常数Km及最大反应速度Vmax由野生型62.25μmol.L-1和***-1变化为345μmol.L-1和***-1,但该位点对CYP2A13酶活性无显著影响;对于CYP2A13,H372R突变对酶活性的影响最为显著,导致Km及Vmax由野生型的26.01μmol.L-1和***-1变为148.7μmol.L-1和***-1,此位点对CYP2A6无显著影响。其他位点突变对酶活性影响较小或不显著。结论CYP2A家族蛋白中,I208与H372分别是影响CYP2A6和CYP2A13对尼古丁代谢的关键残基。对于同家族蛋白酶而言,关键性氨基酸的作用并不总是一一对应。