H9N2亚型禽流感病毒HA基因的表达及其单因子血清的制备

作     者：陈俊霞 孙鹏 许书珍 李思菲 苏帅 赵鹏 崔治中 CHEN Jun-xia;SUN Peng;XU Shu-zhen;LI Si-fei;SU Shuai;ZHAO Peng;CUI Zhi-zhong

作者机构：山东农业大学动物科技学院泰安271018 

出 版 物：《中国畜牧兽医》 (China Animal Husbandry & Veterinary Medicine)

年 卷 期：2015年第42卷第11期

页      面：2888-2894页

学科分类：090603[农学-临床兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：国家自然科学基金NSFC-广东联合基金(U1131005) 

主　　题：H9N2亚型禽流感 HA基因 表达 间接免疫荧光试验(IFA) 单因子血清 

摘      要：为了制备特异性识别H9N2亚型禽流感病毒(AIV)的单因子血清,本试验提取H9N2亚型AIV RNA,RT-PCR后,分别扩增上段HA1、中段HA2和下段HA3 3段基因。将他们插入原核表达载体pET-32a(+)中,转化BL21(Rosetta)菌株中表达。将表达的蛋白常规免疫昆明白小鼠,以制备抗血清。结果显示,成功获得3段重组融合蛋白,且均具有良好的免疫原性。间接免疫荧光试验(IFA)结果显示,上段HA1、中段HA2制备的单因子血清均可与H9N2亚型AIV反应,而下段HA3则不能。重组马立克氏病病毒(MDV)MZC12 HA/NA同样证明HA1、HA2两段制备的单因子血清能识别HA基因的表达。本试验成功制备了识别H9N2亚型AIV HA的单因子血清,为H9N2亚型AIV的鉴别诊断及研究奠定了基础。