重组人成骨蛋白-1在大肠杆菌中的高效表达及复性

作     者：车婧 韩金祥 王世立 梁浩 CHE Jing;HAN Jin-xiang;WANG Shi-li;LIANG Hao

作者机构：山东省医药生物技术研究中心 

出 版 物：《中国药学杂志》 (Chinese Pharmaceutical Journal)

年 卷 期：2005年第40卷第13期

页      面：1023-1026页

核心收录：

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1002[医学-临床医学] 08[工学] 09[农学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家高技术研究发展计划(863)项目(2003AA223532)山东省重大攻关项目 

主　　题：重组人成骨蛋白 纯化 复性 

摘      要：目的研究重组人成骨蛋白-1(rhOP-1)的发酵、纯化和复性。方法将构建好的重组质粒pBV221转化EscherichiacoliBL21,迅速升温至42℃诱导rhOP-1以包涵体的形式高效表达。裂菌后利用6mol·L-1尿素溶解目的蛋白,经SP-FastFlow离子交换色谱纯化后,利用cysteine/cystine对单体rhOP-1透析复性。结果rhOP-1的表达量占菌体总蛋白质量的33%,纯化后纯度可达98%,活性得到有效恢复。结论建立了rhOP-1发酵、纯化与复性的方法,获得高表达、高纯度、有活性的rhOP-1。