猪肝超氧化物歧化酶的分离纯化与初步表征

作     者：肖厚荣 杨红 王中风 翟伟华 XIAO Hou-rong;YANG Hong;WANG Zhong-feng;ZHAI Wei-hua

作者机构：合肥学院生物与环境工程系安徽合肥230022 

出 版 物：《食品研究与开发》 (Food Research and Development)

年 卷 期：2012年第33卷第5期

页      面：25-29页

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：安徽省教育厅自然科学研究重大项目(KJ2010ZD10) 

主　　题：猪肝 超氧化物歧化酶(SOD) 分离纯化 表征 

摘      要：研究猪肝SOD的分离提取、纯化以及初步表征。以猪肝为原料,通过抽提液加热、丙酮沉淀和Sephadex G-200层析柱色谱提取、纯化Cu,Zn-SOD;在单因素试验的基础上,采用L(934)设计对提取工艺进行系统优化。结果表明:经过热变性,可以除去大部分杂蛋白,提高了SOD的比活力;最佳的提取条件是:在1.4%的盐浓度下,于70℃水浴中热变性10 min,然后加1.6倍体积的丙酮获得SOD粗沉淀;溶解后的粗酶液经Sephadex G-200层析柱纯化后,经SDS-PAGE电泳检测为单一条带,HPLC检测显示为单一对称峰,均表明最终得到了高纯度的SOD;紫外-可见吸收光谱和ICP-MS分析结果均表明得到的是含铜、锌的SOD,即Cu,Zn-SOD;以邻苯三酚为底物,该酶的Km值为1.574,Vmax为0.268。