翻译后修饰可能影响黄瓜花叶病毒2b蛋白抑制子活性及稳定性

作     者：李沫 贾燕涛 方荣祥 MO Li;Yantao Jia;Rongxiang Fang

作者机构：中国科学院微生物研究所植物基因组学国家重点实验室北京100101 国家植物基因研究中心北京10010l 中国科学院研究生院北京100049 

出 版 物：《生物工程学报》 (Chinese Journal of Biotechnology)

年 卷 期：2011年第27卷第2期

页      面：212-218页

核心收录：

学科分类：09[农学] 0904[农学-植物保护] 090401[农学-植物病理学] 090402[农学-农业昆虫与害虫防治] 

基　　金：国家自然科学基金(No.30530500) 国家重点基础研究发展计划(973计划)(No.2006CB101906)资助~~ 

主　　题：黄瓜花叶病毒 2b蛋白 翻译后修饰 抑制子活性 蛋白稳定性 

摘      要：黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)编码的2b蛋白具有RNA沉默抑制子功能,为了研究翻译后修饰对2b功能的影响,利用反向PCR定点突变方法对CMV-Q株系2b蛋白的1个预测的磷酸化位点(S40)和2个预测的泛素化/SUMO化位点(K22,K39)进行了点突变,同时将点突变体插入植物表达载体。通过农杆菌共注射法对3个2b突变体的抑制子活性进行了分析,结果证明,当S40突变为A(2bS40A)后,2b抑制局部和系统沉默的活性均大幅降低;当K22突变为R(2bK22R)后,2b的抑制子活性无明显变化;而将K22和K39均突变为R(2bK22R/K39R)后,2b抑制系统沉默的活性则大幅减弱。对叶片中2b突变体的蛋白含量的Western blotting检测表明,与野生型2b蛋白相比,2bK22R在植物中积累水平变化不大,而2bS40A和2bK22R/K39R的蛋白积累量则明显降低,说明K39和S40位点在维持2b蛋白的抑制子活性及其在植物细胞中的稳定性方面起重要作用。