AAV载体质粒介导的荧光素酶shRNA抑制其在哺乳动物细胞中的表达

作     者：马鑫 鲁晓春 彭建强 谭淑萍 袁振华 尹芳 王宏 吴小兵 侯云德 

作者机构：中国预防医学科学院病毒学研究所基因室北京100052 解放军总医院老年心内科 本元正阳基因技术股份有限公司 广州南方医院血液科 

出 版 物：《中华实验和临床病毒学杂志》 (Chinese Journal of Experimental and Clinical Virology)

年 卷 期：2002年第16卷第3期

页      面：253-255页

核心收录：

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

主　　题：AAV载体 质粒介导 荧光素酶 短发夹环RNA 哺乳动物 基因表达 

摘      要：目的 构建荧光素酶短发夹环产生质粒在BHK 2 1细胞中抑制荧光素酶的表达。方法 从人基因组DNA中用PCR方法调出人U6snRNA启动子 ,接以被 9bp序列间隔的 2 1bp荧光素酶靶序列的反向重复序列 ,置于AAV载体质粒pSNAV中 ,构建成荧光素酶短发夹环RNA(shRNA)产生质粒pSNAV U6 Luc。与pMAMneoLuc质粒共转染BHK 2 1细胞 ,检测其对荧光素酶表达的影响。并且单独转染荧光素酶细胞株 ,检测其抑制荧光素酶表达的效果。结果 pSNAV U6 Luc对共转染的pMAMneoLuc中荧光素酶的表达抑制 5 0 % ,而对荧光素酶细胞株中荧光素酶的表达抑制 70 %。结论 实验表明荧光素酶shRNA产生质粒能够有效抑制荧光素酶在BHK 2 1细胞中的表达。