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基于毛细管液滴技术的血液乙型肝炎病毒DNA提取

Droplet-based Blood Hepatitis B Virus DNA Extraction in a Capillary

作     者:梁广铁 王秋平 王维 刘大渔 周小棉 MANG Guang-Tie;WANG Qiu-Ping;WANG Wei;LIU Da-Yu;ZHOU Xiao-Mian

作者机构:广州医学院附属广州市第一人民医院检验科临床化学技术研究室 

出 版 物:《分析化学》 (Chinese Journal of Analytical Chemistry)

年 卷 期:2011年第39卷第5期

页      面:670-674页

核心收录:

学科分类:1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学] 

基  金:“十一五”重大专项(No.2008ZX10004-004) 国家自然科学基金(No.30870753) 广州市医药卫生科技重点项目(No.2009-ZDi-21)资助 

主  题:微全核酸分析系统 DNA提取 液滴 毛细管 乙型肝炎病毒 

摘      要:基于毛细管液滴技术,建立了提取血液中乙型肝炎病毒(HBV)DNA的方法。方法的基本原理是向聚四氟乙烯毛细管中连续引入油相和水相溶液时,由于表面张力作用,可以形成稳定的油包水型液滴。依次引入含有不同试样的液滴,在毛细管中完成进样、DNA结合、洗涤以及洗脱等过程。实验表明,采用蛋白酶K裂解和提高洗脱温度有利于提高DNA回收率。优化后的血清HBV DNA提取操作在25 min内完成,回收率大于60%。本方法的DNA提取量与常规方法相当,而相对标准偏差较大(23.3%vs 12.9%)。本方法具有简单、快速和低成本的优势,有望成为一种微全核酸分析系统样品前处理的有效解决方案。

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