突变SOD1cDNA亚克隆入酵母穿梭表达质粒pGBKT7中

作     者：陈桂生 史树贵 李露斯 陈康宁 袁顺宗 彭旭 吴军 罗高兴 Chen Guisheng;Shi Shugui;Li Lusi;Chen Kangning;Yuan Shunzong;Peng Xu;Wu Jun;Luo Gaoxing

作者机构：第三军医大学西南医院神经内科重庆400038 第三军医大学西南医院烧伤研究所重庆400038 

出 版 物：《中国药业》 (China Pharmaceuticals)

年 卷 期：2008年第17卷第1期

页      面：3-4页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目 项目编号:30300116 

主　　题：突变SOD1cDNA 亚克隆 pGBKT7 

摘      要：目的将突变SOD1cDNA亚克隆入酵母穿梭表达质粒pGBKT7中。方法利用PCR方法从重组子pEGFP-N2-mSOD1中扩增突变的SOD1cDNA片断。以EcoRⅠ/SalⅠ双酶切突变SOD1cDNA片断和酵母穿梭表达质粒pGBKT7,在T4 DNA连接酶的作用下,连接突变SOD1cDNA片断和酵母穿梭表达质粒pGBKT7。转化感受态DH5α,筛选重组子,进行双酶切和测序鉴定。结果经酶切和测序鉴定,突变SOD1cDNA成功地亚克隆入酵母穿梭表达质粒pGBKT7中。结论亚克隆成功,可以对目的基因进行下一步研究。