丁型肝炎病毒重组抗原的制备及应用

作     者：高峰 方华 杨小昂 金志宏 

作者机构：河南省医学科学研究所肝炎病毒研究室郑州450052 

出 版 物：《郑州大学学报（医学版）》 (Journal of Zhengzhou University(Medical Sciences))

年 卷 期：2004年第39卷第5期

页      面：821-823页

学科分类：1010[医学-医学技术（可授医学、理学学位）] 10[医学] 

主　　题：丁型肝炎病毒 重组抗原 丁肝抗原 

摘      要：目的 :获得能够应用于丁型肝炎病毒 (HDV)酶免试剂的重组丁型肝炎病毒抗原。方法 :采用RT PCR自HDV感染急性期的土拨鼠肝脏扩增编码丁型肝炎病毒抗原的HDVcDNA ,插入质粒pET 3α ,转化大肠杆菌BL2 1,制备丁型肝炎病毒抗原表达菌株 ;对其表达蛋白的特异性、灵敏度、稳定性及活性进行鉴定 ;并将以该重组蛋白为主要原料制备的抗 HD酶免试剂与爱尔兰Noctech抗 HD试剂盒进行比较。结果 :重组质粒PED SHDAg和PED LHDAg经异丙基 硫代 β D 半乳糖苷 (IPTG)诱导表达的 2种蛋白经SDS PAGE电泳后 ,WesternBlot检测显示均与抗 HD发生强烈反应。该表达蛋白对抗 HD阳性血清抑制率为 86 % ,37℃保存 7d稳定性良好 ,比活性为 1:80 0 0 ,检测抗 HD灵敏度与国外同类试剂盒结果一致。结论 :该重组丁型肝炎病毒抗原可用于抗 HD酶免试剂的制备。