A型流感病毒NS1蛋白羧基端PL结构域影响NS1在细胞核内的定位

作     者：张丹桂 李卫中 王革非 张衡 曾俊 陈幼莹 张驰 曾祥兴 李康生 ZHANG Dan-Gui**, LI Wei-Zhong**, WANG Ge-Fei, ZHANG Heng, ZENG Jun, CHEN You-Ying, ZHANG Chi, ZENG Xiang-Xing, LI Kang-Sheng*** (Department of Microbiology and Immunology, Key Immunopathology Laboratory of Guangdong Province, Shantou University Medical College, Shantou 515041, China)

作者机构：汕头大学医学院微生物学及免疫学教研室广东省高校免疫病理学重点实验室汕头515031 

出 版 物：《生物化学与生物物理进展》 (Progress In Biochemistry and Biophysics)

年 卷 期：2010年第37卷第9期

页      面：975-982页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 07[理学] 09[农学] 071005[理学-微生物学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(30771988 30972766 81001322) 广东省自然科学基金(9451503102003499) 高等学校博士学科点科研基金(20094402110004) 广东高校优秀青年创新人才培育项目(LYM08056) 农业微生物学国家重点实验室开放课题(AML200910) 汕头大学医学院科研基金资助项目~~ 

主　　题：A型流感病毒 NS1蛋白 PL结构域 核仁 

摘      要：A型流感病毒NS1蛋白羧基端4个氨基酸可以与PDZ结构域(the domain of PSD95,Dig and ZO-1)相结合,称为PL结构域(PDZ ligand domain).对不同亚型或毒株的流感病毒而言,其NS1蛋白PL结构域的组成存在比较大的差异.有研究发现这种差异能够影响NS1与宿主细胞蛋白的相互作用进而影响病毒的致病力.为进一步探讨PL结构域对NS1蛋白生物学特性的影响,首先构建出4种不同亚型流感病毒(H1N1、H3N2、H5N1、H9N2)来源的NS1绿色荧光蛋白表达质粒.在此基础上,对野生型H3N2病毒NS1表达质粒进行人工改造,将其PL结构域缺失或者替换为其他亚型流感病毒的PL结构域,制备出4种重组NS1蛋白表达质粒.通过比较上述不同NS1蛋白在HeLa细胞中的定位情况发现,只有野生型H3N2病毒的NS1蛋白可以定位于核仁当中,而野生型H1N1、H5N1、H9N2病毒的NS1蛋白以及PL结构域缺失或替代的H3N2病毒NS1蛋白都不能定位于核仁.而通过比较上述NS1蛋白在流感病毒易感的MDCK细胞中的定位,进一步发现所有这些蛋白均不定位于核仁.上述结果表明:PL结构域的不同可以明显影响NS1蛋白在HeLa细胞核内的定位和分布,这有可能造成其生物学功能的差异.同时,NS1蛋白在细胞核内的定位还与宿主细胞的来源有着密切关系.