人参皂苷Rb1单克隆抗体的制备与鉴定

作     者：赵寿经 侯春喜 钱延春 徐立新 孙莉丽 Zhao Shou-jing;Hou Chun-xi;Qian Yan-chun;Xu Li-xin;Sun Li-li

作者机构：吉林大学生物与农业工程学院长春130022 

出 版 物：《吉林大学学报（工学版）》 (Journal of Jilin University:Engineering and Technology Edition)

年 卷 期：2007年第37卷第1期

页      面：245-248页

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

基　　金：吉林省科技发展计划项目(20060546) 

主　　题：生物化学工程 单克隆抗体 人参皂苷Rb1 酶联免疫吸附测定(ELISA) 

摘      要：用人参皂苷Rb1分别与牛血清白蛋白（BSA）和卵清蛋白（OVA）反应合成了交联抗原GRb1-BSA（GRb1与BSA的结合比为10：1）和GRb1—OVA（GRb1与OVA的结合比为8：1）。以GRb1—BSA为免疫原，分5次免疫3只BAuyC小鼠，取免疫脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行融合，Hat筛选，有限稀释法克隆。建立分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞系。采用ELISA（酶联免疫吸附测定）间接法和竞争法检测抗体的特异性。结果获得了一只小鼠分泌抗体效价达1：16000，并获得两株分泌GRb1的单克隆抗体的细胞系，分别命名为1F7和1G3，单抗检测显示在0．01～1μg／mL呈线性关系，GRb1的检测范围达50～350ng／mL，两株单抗针对相同的抗原决定簇，制备的单克隆抗体可用于GRb1含量的检测和分离。