大鼠前列腺素D合成酶在毕赤酵母中的表达及其在精子中的分布

作     者：陈德宇 周开亚 黄宇烽 CHEN De_Yu 1,3 ZHOU Kai_Ya 1 HUANG Yu-Feng 2* 1(College of Life Sciences, Nanjing Normal University, Nanjing 210097, China) 2(Laboratory of Reproduction and Genetics, Nanjing General Hospital of Nanjing Command, PLA, Nanjing 210002, China) 3(Department of Biology, Fuyang Normal College, Fuyang 230632, China)

作者机构：南京师范大学生命科学院 南京军区总医院生殖遗传实验室南京210002 

出 版 物：《生物工程学报》 (Chinese Journal of Biotechnology)

年 卷 期：2004年第20卷第6期

页      面：896-900页

核心收录：

学科分类：08[工学] 082203[工学-发酵工程] 0822[工学-轻工技术与工程] 

基　　金：南京军区总医院科研基金项目 (No .2 0 0 40 78) 安徽省教育厅自然科学计划项目 (No .2 0 0 2kj2 3 6)~~ 

主　　题：前列腺素D合成酶 毕赤酵母 分布 

摘      要：研究大鼠L PGDS在毕氏酵母中的表达 ,探讨L PGDS在大鼠精子中的分布。以大鼠睾丸mRNA为模板 ,经逆转录获得L PGDS全长和成熟基因片段。将该基因片段克隆到pPIC9载体上 ,将重组表达质粒转化巴斯德毕赤酵母 (Pichiapastoris)GS115 ,筛选mut+ 表型 ,经甲醇诱导实现L PGDS的分泌表达。用SDS PAGE分析L PGDS的分子量 ,用PAS反应鉴定糖链 ,用免疫组织化学法研究L PGDS的分布 ,用Westernblot分析重组L PGDS与精浆中L PGDS。筛选出 4株表达水平较高的酵母工程菌株 ,SDS PAGE分析表明 ,产物分子量约为 2 7kD ;L