GADD45g通过抑制E2F1在急性髓系白血病中发挥抑癌作用

作     者：常利珍 赵杨杨 郭丹 王楠 尹静 任倩 尤娜 马小彤 CHANG Lizhen;ZHAO Yangyang;GUO Dan;WANG Nan;YIN Jing;REN Qian;YOU Na;MA Xiaotong

作者机构：中国医学科学院血液病医院血液学研究所暨实验血液学国家重点实验室 

出 版 物：《中国肿瘤生物治疗杂志》 (Chinese Journal of Cancer Biotherapy)

年 卷 期：2019年第26卷第7期

页      面：736-742页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(No.81670158,No.81470278,No.81600138,No.81700106) 天津市应用基础与前沿技术研究计划项目(No.17JCZDJC35100,No.15JCQNJC10300,No.17JCQNJC10800)~~ 

主　　题：转录因子E2F1 生长阻滞和DNA损伤诱导蛋白45g 急性髓系白血病 细胞凋亡 

摘      要：目的:检测转录因子E2F1与生长阻滞和DNA损伤诱导蛋白45g(GADD45g)基因在急性髓系白血病(AML)患者中表达的相关性,探讨GADD45g是否通过抑制E2F1诱导AML细胞DNA损伤、凋亡、衰老、周期阻滞和提高药物敏感性。方法:选取2013年1月至2016年12月中国医学科学院血液病医院初诊为AML患者32例骨髓标本及AML细胞系U937、HL60、THP-1和Molm-13,用q PCR检测组织和细胞中GADD45g和E2F1 m RNA的表达水平,并分析其相关性。构建E2F1过表达载体,并制备重组慢病毒在过表达GADD45g的Molm-13和THP-1细胞中过表达E2F1,通过彗星实验、Annexin V/7AAD流式细胞术、β-半乳糖苷酶染色和PI染色流式细胞术等确定GADD45g是否通过抑制E2F1对AML细胞发挥抑癌作用。结果:AML患者骨髓和细胞系中GADD45g和E2F1 m RNA的表达呈显著负相关(r=–0.663,P0.01)。GADD45g在AML细胞系中过表达显著抑制了E2F1的表达(均P0.01)。成功构建同时过表达GADD45g和E2F1的Molm-13和THP-1细胞,与对照组比较,过表达组细胞GADD45g和E2F1蛋白表达水平均显著升高(均P0.01)。与过表达GADD45g的细胞相比,同时过表达GADD45g和E2F1细胞的凋亡、衰老率和DNA损伤水平均显著降低(均P0.01);在过表达GADD45g的细胞中过表达E2F1逆转了GADD45g诱导的周期阻滞(均P0.01),进而降低了过表达GADD45g对化疗药物的敏感性(均P0.01)。结论:GADD45g通过抑制E2F1在AML中发挥抗肿瘤作用。