熊猫源唾液乳杆菌的分离鉴定及部分生物学特性分析

作     者：王黎明 张文平 王洁 谢军金 周杰珑 WANG Liming;ZHANG Wenping;WANG Jie;XIE Junjin;ZHOU Jielong

作者机构：西南林业大学生命科学学院昆明650224 成都大熊猫繁育研究基地成都610081 

出 版 物：《野生动物学报》 (CHINESE JOURNAL OF WILDLIFE)

年 卷 期：2019年第40卷第3期

页      面：537-546页

学科分类：0710[理学-生物学] 1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 07[理学] 071005[理学-微生物学] 10[医学] 

基　　金：云南省研发经费投入补助项目(2016YB462&2017YB236) 成都大熊猫繁育研究基金会(CPF2015-01、CPF2017-11) 成都大熊猫繁育研究基地(CPB2016-02)资助 

主　　题：大熊猫 抗生素 益生菌 唾液乳杆菌 

摘      要：本研究旨在分离大熊猫肠道内唾液乳杆菌,为获得抑菌效果好,适应性强的熊猫源乳酸菌。通过选取健康大熊猫新鲜粪便,利用MRS培养基进行厌氧培养和单克隆纯化,通过形态学、生理生化鉴定、16S rDNA基因序列测定及同源性分析筛选到10株唾液乳杆菌。采用牛津杯法、活菌计数法、药敏纸片法( K-B法)和PCR技术对分离菌株作进一步的耐受性、抑菌性和耐药性分析。结果表明:ZM02、ZZ03菌株在pH2.0的条件下培养2 h有76.62%、80.75%的存活率;在胆盐浓度为0.3%的条件下培养2 h有97.76%、99%的存活率。抑菌试验结果表明:大肠杆菌抑菌效果最佳为ZM01 ( 10.45±0.43 ) mm;乙型副伤寒沙门氏菌抑菌效果最佳为ZZ03 ( 12.58±0.24 ) mm;铜绿假单胞菌抑菌效果最佳为ZZ04 ( 13.99±0.29 ) mm;金黄色葡萄球菌抑菌效果最佳为ZM06 ( 16.85±0.32 ) mm。耐药基因检测结果表明26对耐药基因仅有ZM02菌株未检测含有耐药基因。药敏实验表明:分离菌株对青霉素类(盘尼西林除外)、其他抗生素类(呋喃妥因、亚胺培南)和氯霉素类均无耐药。综上所述,本研究从大熊猫新鲜粪便中分离鉴定得到10株唾液乳酸杆菌并从中筛选到一株生物特性好、抑菌效果明显、不含耐药基因的唾液乳杆菌-编号103并命名ZM02。该研究可为后续熊猫源微生态制剂提供发展空间。