抗H9亚型禽流感病毒血凝素单克隆抗体的制备及其生物学特性
Preparation and Biological Characterization of Monoclonal Antibodies against H9 Subtype of Avian Influenza Virus作者机构:南京农业大学动物医学院江苏南京210095 江苏省农业科学院兽医研究所江苏南京210014 江苏省农业科学院财务基建处江苏南京210014
出 版 物:《江苏农业学报》 (Jiangsu Journal of Agricultural Sciences)
年 卷 期:2006年第22卷第2期
页 面:127-130页
学科分类:090603[农学-临床兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学]
基 金:江苏省科技成果转化专项资金"兽用疫苗成果转化与产业化示范"(BA2004032)
摘 要:以灭活的H9亚型禽流感NJ01病毒株作为抗原,按常规方法免疫BALB/c鼠,最后一次免疫后第3d取脾细胞与SP2/0细胞进行融合,采用HI进行筛选,检出18个阳性孔,阳性率为4.69%。对其中的3个阳性值较高的孔进行3次克隆,最终获得3株单克隆细胞,分别命名为1E1、2E10和3G2。通过与新城疫病毒、产蛋下降综合征病毒、H5亚型禽流感病毒进行HI试验,证明1E1、2E10和3G2分泌的抗体具有特异性。经连续1个月的体外培养和两次冻存复苏仍能稳定地分泌抗H9亚型禽流感Hl抗体,3株杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体均为IgG1,杂交瘤细胞的染色体数目为92—108条,平均97条。杂交瘤细胞培养上清和腹水对H9亚型禽流感病毒的Hl值分别为2^5~2^8和2^12~2^***50分别10^-2~10^-1.67和10^-4~10^-3.33单克隆抗体的制备为禽流感的快速诊断、预警预报和病毒的抗原性分析等奠定了基础。