芍药属SRAP反应体系优化与亲缘关系分析
Optimization of SRAP Reaction System and Genetic Relationship in Paeonia作者机构:青岛农业大学园林与林学院山东青岛266109
出 版 物:《北方园艺》 (Northern Horticulture)
年 卷 期:2019年第10期
页 面:93-101页
学科分类:090706[农学-园林植物与观赏园艺] 0907[农学-林学] 09[农学]
基 金:山东省林业科技创新资助项目(LYCX05-2018-26) 青岛农业大学高层次人才科研基金资助项目(6631114306)
摘 要:以牡丹芍药杂交种‘东方金’和牡丹品种‘灰鹤’为试材,对SRAP-PCR反应体系和反应程序进行了优化,并利用优化的体系对芍药属65个品种进行了亲缘关系分析,以期建立稳定的芍药属植物SRAP分子标记技术体系。结果表明:芍药属植物的SRAP-PCR最佳程序为94℃预变性3 min;94℃变性30 s,37℃退火30 s,72℃延伸90 s,退火温度每个循环增加1℃,8个循环;94℃变性30 s,50℃退火30 s,72℃延伸90 s,32个循环;最后72℃延伸7 min。20μL反应体系中各成分的最佳浓度依次为Mg^(2+) 2.5 mmol·L^(-1),dNTPs 0.2 mmol·L^(-1),Taq酶1 U、引物浓度0.3μmol·L^(-1)。16对引物对65份材料进行PCR扩增共扩增出了1 229个条带,均为多态性条带,多态性高达100%,芍药和杂种聚为一类,牡丹聚为一类,说明杂种与芍药亲缘关系更近。该研究建立的芍药属SRAP-PCR体系重复性好、稳定性强,适合芍药属植物SRAP的研究,为进一步研究芍药属植物种质资源遗传多样性、品种鉴定、分子标记辅助育种等方面奠定基础。