环状RNA分子circ＿0007766通过上调细胞周期相关蛋白Cyclin D1/CyclinE1/CDK4的表达促进肺腺癌细胞增殖

作     者：张帅 夏文佳 董高超 徐维章 李明 许林 Shuai ZHANG;Wenjia XIA;Gaochao DONG;Weizhang XU;Ming LI;Lin XU

作者机构：江苏省肿瘤医院&江苏省肿瘤防治研究所&南京医科大学附属肿瘤医院胸外科 江苏省恶性肿瘤分子生物学及转化医学重点实验室南京210009 

出 版 物：《中国肺癌杂志》 (Chinese Journal of Lung Cancer)

年 卷 期：2019年第22卷第5期

页      面：271-279页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：江苏省卫计委青年课题(No.Q2017004) 江苏省卫计委十三五计划青年医学人才(No.QNRC2016656) 江苏省六大高峰人才项目(No.WSN-042)资助~~ 

主　　题：肺腺癌 环状RNA/circRNA circ_0007766 

摘      要：背景与目的环状RNA(circular RNA, circRNA)是有别于传统线性RNA的一类新型非编码RNA(noncoding RNA,ncRNA),越来越多的研究提示circRNA可作为诸多恶性肿瘤的生物学标志物,并成为治疗的潜在靶标。因此从circRNA角度挖掘肺腺癌新型分子靶标,将有助于揭示肺腺癌发生发展新机制,并为临床诊疗提供新思路。本研究针对前期筛选出的一个肺腺癌组织高表达circRNA即circ_0007766进行体外生物学功能验证和分析,从而对circ_0007766促进肺腺癌增殖的相关机制进行初步探索。方法首先通过qPCR检测考察肺腺癌细胞中circ_0007766的表达水平,然后采用siRNA干扰circ_0007766的表达,通过CCK8法、划痕修复、PI单染和AnnexinV/PI双染方法检测circ_0007766沉默表达对肺腺癌细胞的增殖、周期和凋亡作用的影响。此外,我们还采用qPCR和western blots方法初步研究了circ_0007766在肺腺癌细胞中的生物学作用机制。结果 qPCR检测表明肺腺癌细胞株中表达有circ_0007766,在SPCA-1细胞中干扰circ_0007766表达,发现细胞增殖和迁移能力受到了抑制,细胞周期发生了G_0/G_1期阻滞,而细胞凋亡则不受影响。circ_0007766的缺失并不影响其亲本基因ERBB2的mRNA表达,而对eIF4A3调控的细胞周期相关基因Cyclin D1/Cyclin E1/CDK4的mRNA和蛋白水平均有影响。结论本研究通过体外功能学研究,发现circ_0007766可能对肺腺癌细胞增殖、迁移具有促进的作用,进一步的分子机制研究发现circ_0007766可上调细胞周期关键蛋白Cyclin D1/Cyclin E1/CDK4的表达,进而促进肺腺癌恶性增殖。本研究以circRNA为视角,将对肺腺癌发生发展机理及预后判断提供新线索,为临床治疗应用提供新靶标。