板栗SSR标记研究中聚丙烯酰胺凝胶银染显影体系的优化

作     者：聂兴华 张卿 刘阳 代月星 曹庆芹 秦岭 NIE Xinghua;ZHANG Qing;LIU Yang;DAI Yuexing;CAO Qingqin;QIN Ling

作者机构：北京农学院植物科学技术学院北京102206 农业应用新技术北京市重点实验室北京102206 北京农学院生物科学与工程学院北京102206 

出 版 物：《北方园艺》 (Northern Horticulture)

年 卷 期：2019年第12期

页      面：27-33页

学科分类：09[农学] 0902[农学-园艺学] 090201[农学-果树学] 

基　　金：河北科技计划专项资助项目(162268230) 北京市属高等学校创新团队建设与教师职业发展计划资助项目(IDHT20180509) 北京市自然科学基金重点(B)类资助项目(KZ201710020012) 

主　　题：聚丙烯酰胺凝胶 板栗 正交实验 银染显影效果 

摘      要：为筛选出高效、稳定的银染显影体系,以板栗叶片DNA为扩增模板,利用L16(45)正交实验设计的方法,研究了AgNO3使用量、CH2O使用量、Na2CO3使用量及上样量4个主要因素对聚丙烯酰胺凝胶银染显影的影响,并对优化出的方法在银染效果、试剂使用和显影时耗等方面进行分析。结果表明:在碱性条件下,0.1%AgNO3+1mL CH2O+0.2g Na2CO3(500mL体系)+1.5μL上样量的银染显影效果最佳。筛选出的体系能有效克服胶图分辨率低、背景暗,读带不清晰和危险试剂消耗大的问题,为批量试验、快速读带提供了支持。