GGC54GAC MBL突变体的构建

作     者：陈政良 卢晓 张丽芸 韩强涛 

作者机构：第一军医大学免疫学教研室广州510515 

出 版 物：《中国免疫学杂志》 (Chinese Journal of Immunology)

年 卷 期：2001年第17卷第5期

页      面：260-262,265页

核心收录：

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助! (No .39970 2 86 ) 

主　　题：甘露聚糖结合凝集素 GGC54GAC突变体 定点突变 MBL 

摘      要：目的 :在人甘露聚糖结合凝集素 (MBL)基因中引入GGC5 4GAC点突变。方法 :设计上下游引物和诱变引物 ,以汉族人野生型MBLcDNA为模板 ,采用megaprimer PCR技术进行定点突变 ,将PCR产物克隆至pGEM T载体 ,酶切和测序分析。结果 :以上游引物和诱变引物进行第一轮PCR ,获得一约 180bp的DNA片段 ,以此片段和下游引物行第二轮PCR扩增 ,得到一长约 780bp的产物 ;将其克隆至pGEM T载体 ,酶切发现第 5 4位密码中的BanI酶切位点已被破坏 ,与计算机酶切图谱分析结果一致 ;序列分析表明 ,除第 5 4位密码变为GAC外 ,余与野生型MBLcDNA完全相同。结论 :构建成功了GGC5 4GACMBL突变体 。