牛羊猪种布鲁氏菌快速鉴别PCR方法的建立及评价

作     者：刘志国 塔娜 李晓燕 王妙 赵鸿雁 朴东日 蔚瑞平 米景川 李振军 LIU Zhi-guo;TA Na;LI Xiao-yan;WANG Miao;ZHAO Hong-yan;PIAO Dong-ri;YU Rui-ping;MI Jing-chuan;LI Zhen-jun

作者机构：中国疾病预防控制中心传染病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室北京102206 内蒙古自治区综合疾病预防控制中心呼和浩特010031 乌兰察布市地方病防治中心乌兰察布012000 

出 版 物：《中国人兽共患病学报》 (Chinese Journal of Zoonoses)

年 卷 期：2019年第35卷第5期

页      面：399-403页

核心收录：

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学] 

基　　金：内蒙古自治区自然科学基金项目(No.2018MS08004) 传染病重大专项(No.2017ZX10303401) 生物安全重点专项(No.2017YFC1200303) 生物安全重点专项(No.2016YFC1200701)联合资助~~ 

主　　题：布鲁氏菌 聚合酶链式反应 鉴别 评价 

摘      要：目的建立一种可在一个反应体系中同时鉴别布鲁氏菌及牛羊猪种布鲁氏菌的快速PCR鉴别方法。方法将布鲁氏菌及牛羊猪种布鲁氏菌的扩增引物进行优化组合,建立全新的BAMS-PCR方法;随后对该方法的特异性和灵敏度进行评价,并对现场分离的219株布鲁氏菌进行鉴别,评价其在布鲁氏菌鉴别中的应用价值。最后,用该方法对临床标本中布鲁氏菌的DNA进行扩增,评价其在临床诊断中的实用性。结果 BAMS-PCR方法可在同一反应中同时鉴别布鲁氏菌及牛种(1,2,4型),羊种(1,2和3型)和猪种(1型)布鲁氏菌,并有较好的特异性和敏感性。布鲁氏菌属,牛种,猪种和羊种布鲁氏菌引物的检测灵敏度分别为10 pg/μL,100 pg/μL, 10 pg/μL和100 pg/μL。BAMS-PCR对219株临床分离菌株的鉴定结果和常规生物分型方法的鉴定符合率为100%。经BAMS-PCR检测,97份临床血清样本仅6份为阳性,全血和组织(羊脾)样本全部为阴性。结论 BAMS-PCR是一种简便、快速、高效、准确的布鲁氏菌鉴别方法,可作为临床分离菌株的首选鉴别方法。