长片段RNA抑制HepG2.2.15细胞中HBV基因的表达和复制
Long-fragment RNA inhibits hepatitis B virus gene replication and expression in HepG2.2.15 cells作者机构:重庆医科大学附属第二医院消化内科400010 四川省华蓥市人民医院 重庆医科大学病毒性肝炎研究所
出 版 物:《中华肝脏病杂志》 (Chinese Journal of Hepatology)
年 卷 期:2011年第19卷第1期
页 面:44-47页
核心收录:
学科分类:1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 100401[医学-流行病与卫生统计学] 10[医学]
基 金:国家自然科学基金(30700708,30971612) 重庆市卫生局重点项目(2009-1-17)
摘 要:目的 评估长的反义RNA干扰片段在培养细胞株中对HBV复制的抑制效应.方法将HBV基因组S区的全部核苷酸序列插入至pTARGETTM载体中,并将重组载体转染入HepG2.2.15细胞中.用酶联免疫吸附法检测HBsAg与HBeAg水平,用荧光定量PCR法检测HBVDNA水平.对数据采用多个独立样本Kruskal-Wallis检验与两两比较的Mann-Whitney U检验.结果 经过处理后,HepG2.2.15细胞上清液中HBsAg表达量(A值)在HBS2组(携带长片段反义RNA)为0.621±0.027,在HBS4组(携带正义RNA)为3.399±0.018,对照组为2.232±0.187;HBeAg表达量(A值)在HBS2组、HBS4组和对照组分别为0.749±0.019、1.548±0.025和1.570±0.044; HBV DNA水平(×104拷贝/ml)在HBS2组、HBS4组、对照组分别为1.597±0.082、3.381±0.297和3.610±0.063.与对照组相比,HBS2组HBsAg、HBeAg和HBV DNA表达量均降低,统计量Z值均为-2.309,P值均0.05; HBS4组HBsAg表达量增高(Z=-2.309,P0.05),而HBeAg和HBV DNA表达量无明显差异,统计量Z值分别为-0.866、-1.155,P值均0.05.结论 长片段反义RNA能抑制HBV基因的表达和病毒复制.